产品简介
本品所配制的凝胶能分离高分子量(40~300kDa)蛋白可均匀分布,并且在普通电泳液150V恒压条件下,47min即可完成电泳。
试剂盒采用上层胶和下层胶的预混配方,只需加入 改良型促凝剂 即可凝胶,灌入下层胶后,无需等待凝胶,直接灌入上层胶即可,简便快捷。所配的上层胶带有颜色 ( 红色、橙色,黄色,绿色,蓝色,紫色),点样孔清晰易辨, 方便点样。 本产品配套提供 改良型促凝剂 ,其具有更好的稳定性和催化效能,配胶过程中无需额外添加 TEMED。为方便操作,已开盖的 改良型促凝剂 可置于4℃保存至少三个月。
操作流程
以一块 0.75/1.0/1.5mm 的mini胶为例
1.取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液,各2.0/2.7/4.0mL,轻晃混匀。
2.取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液,各 0.5/0.75/1.0mL,轻晃混匀(注意:由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀)
3.将步骤1的混合溶液加入40/60/80μL的改良型促凝剂混匀后注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可
注意:此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许于配胶杯中,以判断胶凝固状况,
4.向步骤2的混合溶液加入 10/15/20μL的改良型促凝剂,轻晃混匀后,无需等待下层胶凝固,即可注入制胶玻璃板中,插入梳齿;上层胶凝固后(约15min),拔去梳齿即可用于电泳。
注:胶凝固后上下层胶分界线平整度略弱于传统方法配的胶,但对后续电泳没有影响。
注意:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
注意事项
1. 在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。
2. 本试剂盒上层胶无浓缩能力,只起上样作用,对最后分离效果无影响。
3. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量;相反,如果室温较低,可适当加大改良型促凝剂的用量。
4.推荐电泳条件为:150V,约47min,具体电泳时间根据电泳仪不同有差异。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次手套。
保存温度
本品常温运输,保存于4℃,其中改良型促凝剂保存于-20℃,保质期12个月。