Ghrelin 概述
胃饥饿素(Ghrelin)，这个基因编码胃泌素释放肽-肥胖抑素前体蛋白，该蛋白可被裂解产生两种肽：胃泌素释放肽和肥胖抑素。胃泌素释放肽是一种强效的食欲刺激剂，在能量稳态中发挥重要作用。当胃为空时，其分泌开始，随后与下丘脑中的生长激素促分泌素受体结合，导致生长激素（促生长素）的分泌。据认为，胃泌素释放肽可调节多种活动，包括通过中脑边缘通路产生饥饿感和奖赏感知、胃酸分泌、胃肠道蠕动以及胰腺葡萄糖刺激的胰岛素分泌。最初有人提出，肥胖抑素通过促进饱腹感从而减少食物摄入，与胃泌素释放肽发挥相反的作用，但这一观点仍存在争议。最近的报告表明，肥胖抑素具有多种代谢作用，包括调节脂肪细胞功能和葡萄糖代谢。可变剪接会产生多种转录变体。此外，已确定该基因的反义转录本，并可能潜在地调节胃泌素释放肽-肥胖抑素前体蛋白的表达。
别名
MTLRP
用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 Ghrelin浓度。
检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。
|
反应类型 |
双抗夹心法 |
|
规格 |
96T/48T |
|
中文名称 |
兔饥饿素（ghrelin）ELISA试剂盒 |
|
反应时间 |
1.5 h |
|
检测方法 |
酶联免疫吸附测定 |
|
检测范围 |
31.25 pg/mL – 1000 pg/mL |
|
灵敏度 |
14.69 pg/mL |
|
上样体积 |
50 μL/孔 |
|
样本类型 |
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
特异性
可检测样本中的 Ghrelin , 且与其它类似物无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
标曲图
批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100 CV<10% Inter-批间差: CV<13%
稳定性
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
试剂盒的组成
▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封4℃保存，其他4℃保存。
|
英文名称 |
中文名称 |
规格 |
规格 |
|
Microelisa stripplate |
包被微孔板 |
96T |
48T |
|
Standard |
标准品 |
0.3ml/管*6 |
0.3ml/管*6 |
|
HRP-Corjugate |
HRP标记抗体 |
10mL |
5mL |
|
Sample Diluent |
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
|
Chromogen SolutionA |
底物液A |
6mL |
3mL |
|
Chromogen SolutionB |
底物液B |
6mL |
3mL |
|
Stop Solution |
终止液 |
6mL |
3mL |
|
20× Wash Solution |
20×浓缩洗涤液 |
25mL |
15mL |
|
Product Description |
说明书 |
1份 |
1份 |
|
Sealing film |
封板膜 |
2张 |
2张 |
实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）
2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸馏水或去离子水.
5、脱脂棉吸水纸.
6、37℃恒温箱.
7、100ml和1000ml量筒.
