正确处理样本是获得可靠实验数据的第一步，请根据样本类型选择对应的操作流程。
常见样本类型及处理方法
🩸 血清
- 全血标本室温放置 2小时 或 4℃ 过夜。
- 于 1000g 离心 20分钟，取上清检测。
- 可保存于 -20℃ 或 -80℃，需避免反复冻融。
🧪 血浆
- 使用 EDTA 或 肝素 作为抗凝剂。
- 采集后 30分钟内，于 2-8℃，1000g 离心 20分钟，取上清。
- 可保存于 -20℃ 或 -80℃，需避免反复冻融。
🧫 组织匀浆
- 用预冷 PBS (0.01mol/L, pH7.2-7.4) 冲洗组织，去除残留血液。
- 称重后剪碎，按 1:9 (重量:体积) 比例加入PBS（可加蛋白酶抑制剂）。
- 于冰上充分研磨，可进行超声破碎或反复冻融辅助裂解。
- 于 5000×g 离心 5-10分钟，取上清检测。
🧬 培养的细胞
- 动物细胞：PBS稀释至约100万/ml，反复冻融或超声破碎。
- 植物细胞：PBS稀释至约100万/ml，冰浴超声破碎。
- 组织细胞：1g组织加9g PBS匀浆，离心后PBS洗涤沉淀3次，再用上述方法破碎细胞。
- 以上方法处理后，均需于 2-8℃，2000-3000rpm 离心 20分钟，取上清检测。
🌱 植物标本
- 精提法：0.1g新鲜组织液氮研磨，加1ml 80%甲醇 -20℃过夜，离心取上清，过C-18固相萃取柱，氮气吹干，PBS定容后离心取上清。
- 推荐法：同“组织匀浆”处理流程。
🧴 尿液/胸腹水/脑脊液/牛奶/蜂蜜
- 用无菌管收集样本。
- 于 2-8℃，2000-3000rpm 离心 20分钟。
- 仔细收集上清。保存中如有沉淀形成，应再次离心。
🌍 土壤 / 粪便
- 称取 1g 样本，加入 9ml PBS (pH7.2-7.4)。
- 用手工充分混匀。
- 于 2-8℃，2000-3000rpm 离心 20分钟，取上清检测。
🦠 咽拭子
- 加入 2ml PBS (pH7.2-7.4)，溶解拭子头部并摇匀，挤干拭子。
- 于 2-8℃，2000-3000rpm 离心 20分钟，取上清。
- 测分泌蛋白直接取上清；测细胞内蛋白需破碎细胞。
- 分装一份待检测，其余冷冻备用，如有沉淀再次离心。
📌 通用注意事项
- 避免反复冻融：所有样本（尤其是血清、血浆）应分装保存，减少冻融次数。
- 低温操作：大部分样本处理（如匀浆、离心）建议在 2-8℃ 或冰浴条件下进行，以保护蛋白活性。
- 离心条件：不同样本离心速度和时间不同，请严格参照上述要求，以确保有效去除杂质。
- 裂解辅助：对于细胞或组织样本，超声破碎 或 反复冻融 是常用的辅助裂解方法，可根据实际情况选择。
