用途
该试剂盒采用竞争法检测血清、血浆、组织、细胞培养上清液中3-Nitrotyrosine的浓度。
检测原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记 3-Nitrotyrosine ，纯化的抗 3-Nitrotyrosine 抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记 3-Nitrotyrosine 及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的3-Nitrotyrosine 结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的 3-Nitrotyrosine 结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化 3-Nitrotyrosine ，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化 3-Nitrotyrosine -酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着3-Nitrotyrosine浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中 3-Nitrotyrosine 的减少或升高有可靠的检出性能。
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反应类型 |
竞争法 |
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规格 |
96T/48T |
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中文名称 |
3-硝基酪氨酸（3-NT）ELISA试剂盒 |
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反应时间 |
1.5 h |
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检测方法 |
酶联免疫吸附测定 |
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检测范围 |
7.5 nmol/L - 240 nmol/L |
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灵敏度 |
1.0 nmol/L |
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上样体积 |
50 μL/孔 |
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样本类型 |
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
特异性
可检测样本中的3-Nitrotyrosine , 且与其它类似物无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
标曲图
批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100 CV<10% Inter-批间差: CV<13%
稳定性
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
试剂盒的组成
▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封4℃保存，其他4℃保存。
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英文名称 |
中文名称 |
规格 |
规格 |
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Microelisa stripplate |
包被微孔板 |
96T |
48T |
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Standard |
标准品 |
0.3ml/管*6 |
0.3ml/管*6 |
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HRP-Corjugate |
HRP标记抗体 |
10mL |
5mL |
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Sample Diluent |
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
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Chromogen SolutionA |
底物液A |
6mL |
3mL |
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Chromogen SolutionB |
底物液B |
6mL |
3mL |
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Stop Solution |
终止液 |
6mL |
3mL |
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20× Wash Solution |
20×浓缩洗涤液 |
25mL |
15mL |
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Product Description |
说明书 |
1份 |
1份 |
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Sealing film |
封板膜 |
2张 |
2张 |
实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）
2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸馏水或去离子水.
5、脱脂棉吸水纸.
6、37℃恒温箱.
7、100ml和1000ml量筒.
