APO-B 概述

载脂蛋白B(APO-B)，该基因产物是乳糜微粒和低密度脂蛋白（LDL）的主要载脂蛋白，也是低密度脂蛋白受体的配体。它在血浆中以两种主要异构体形式存在，即载脂蛋白B-48（apoB-48）和载脂蛋白B-100（apoB-100）：前者仅在肠道合成，后者在肝脏合成。肠道型和肝脏型载脂蛋白B由单一基因编码，该基因转录生成一条非常长的mRNA。这两种异构体具有相同的N端序列。较短的载脂蛋白B-48蛋白是在载脂蛋白B-100转录本的第2180位残基（CAA->UAA）经过RNA编辑后产生的，这导致形成了一个终止密码子，使翻译提前终止。该基因或其调控区的突变会导致由于配体缺陷型载脂蛋白B而引起的低β脂蛋白血症、血甘油三酯正常的低β脂蛋白血症和高胆固醇血症，这些疾病会影响血浆胆固醇和载脂蛋白B的水平。

别名

FLDB; FCHL2; LDLCQ4; apoB-48; apoB-100

用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 apo-B 浓度。

检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

特异性

可检测样本中的 apo-B  , 且与其它类似物无明显交叉反应。

重复性

板内，板间变异系数均<10%。

标曲图

批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封4℃保存，其他4℃保存。

实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.