氧化应激（Oxidative Stress, OS）是体内氧化与抗氧化作用失衡、倾向氧化的状态。它没有可直接读取的数值，只能通过分子层面的痕迹来度量：自由基攻击脂质后生成的产物，以及机体清除自由基所调动的酶。MDA、SOD 与 GSH-Px 是这三类痕迹中最常用的检测指标。
为何需要间接测量
有氧代谢持续产生自由基。正常情况下，产生速率与清除速率相当，浓度维持在低水平；当外源或内源刺激使产生超过清除时，平衡被打破，即进入氧化应激状态。过量自由基会与蛋白质、脂质和核酸反应，改变其结构与功能。相关自由基包括活性氧簇（ROS：O₂⁻、H₂O₂、·OH）与活性氮簇（RNS：NO、ONOO⁻）。
自由基半衰期极短，难以直接定量。可行的测定路径有两条：一是测自由基攻击生物分子后生成的稳定代谢产物，反映已发生的损伤；二是测抗氧化酶活性，反映防御能力。两条路径各覆盖一个侧面，单一指标不足以支撑结论。
损伤侧：丙二醛（MDA）
脂质是自由基的主要靶点。氧自由基（OFR）攻击细胞膜不饱和脂肪酸，启动脂质过氧化链式反应，生成脂质过氧化物，后者分解后释放出丙二醛（MDA）。MDA 性质稳定、便于检测，是衡量脂质过氧化程度最常用的指标，其水平同时反映过氧化速率与组织损伤程度。
防御侧：SOD 与 GSH-Px
MDA 反映损伤结果，SOD 与 GSH-Px 反映机体应对损伤的能力，两者在抗氧化链条上前后衔接。
SOD 是第一道防线。它催化超氧阴离子歧化为氧和过氧化氢，是抗氧化酶系统中最先发挥作用的成员。Cu/Zn-SOD 分布最广，存在于细胞质中；Mn-SOD 位于线粒体，在氧化应激增强时被诱导表达，其水平本身即可作为应激指示。SOD 测定值反映机体清除氧自由基的能力。
GSH-Px 承接下游。SOD 的产物 H₂O₂ 仍具毒性，需由 GSH-Px 催化 GSH 转化为 GSSG，同时将 H₂O₂ 还原为 H₂O 和 O₂。其活性中心为硒半胱氨酸，活力高低反映机体硒水平，是衡量抗过氧化能力的重要指标。
指标之间的关系
MDA、SOD 与 GSH-Px 并非独立的三项检测，而是同一条氧化损伤链条上的不同环节，关系可概括为"一条通路、两个侧面"。
反应顺序上，两者前后衔接。SOD 生成 H₂O₂，GSH-Px 清除 H₂O₂，任一环节失效都会使过氧化物向下游累积。SOD 升高而 GSH-Px 不足，意味着 H₂O₂ 生成加快却清除不力，氧化压力可能不降反升。
损伤与防御上，MDA 与两种酶构成因果两端。MDA 处于链条末端，反映已发生的损伤；两种酶处于前端，反映阻止损伤的能力。单看任一端都无法判断应激程度，必须两端合看。
变化方向上，抗氧化酶具有双向性。应激初期酶活性常因诱导表达而升高，属代偿性上调；超出代偿能力后转而下降，提示防御耗竭。因此酶活性升高与降低都需结合 MDA 判读：MDA 升高伴酶升高多为代偿期，伴酶降低则提示失代偿。
实验设计时应同时测定损伤侧与防御侧指标：MDA 确认损伤是否发生及其强度，SOD 与 GSH-Px 判断防御应答状态，三者组合才能对氧化应激水平作出较完整的判断。
