超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测，以满足客户对精确性，特异性，准确度和灵敏度的要求。
预期用途
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中英夫利昔单抗抗体（Remicade）的浓度。
检测原理
本试剂盒采用间接两步法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被人 TNFα蛋白（固相抗原）的微孔酶标板中，加入不同浓度校准品和待测样本，经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，再加入抗人 IgG1-HRP（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产生蓝色产物，在终止液作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中待测抗体的浓度呈正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本待测抗体的浓度。
数据参数
| 实验方法 | 间接两步法 |
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规格 |
96T(可拆卸) |
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反应性 |
Other |
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检测范围 |
25 ng/mL – 800 ng/mL |
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灵敏度 |
1.0 ng/mL |
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上样体积 |
50 μL/孔 |
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样本类型 |
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
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敏感性/最低检测浓度计算方式 |
敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
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变异系数 |
板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
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回收率 |
85%-115% |
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保存条件 |
未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封4℃保存，其他4℃保存 |
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有效期 |
6个月。 |
标曲图
试剂盒的组成
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组分 |
数量 |
主要成分 |
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校准品 |
0.3ml/管*6管 |
抗体配制的6个浓度标准品 |
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包被微孔板 |
96T |
预包被固相抗原 |
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HRP 标记抗体 |
10mL |
HRP 标记的检测抗体 |
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底物液 A |
6mL |
过氧化氢工作液 |
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底物液 B |
6mL |
TMB 工作液 |
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样本稀释液 |
60mL |
PBS |
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终止液 |
6mL |
酸性溶液 |
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20×浓缩洗涤液 |
30mL |
含 0.15%Tween20 的 PBS |
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说明书 |
1 份 |
- |
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自封袋 |
1 个 |
- |
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不干胶 |
2 片 |
- |
实验所需自备物品
1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.振荡器。
4.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器。
注意事项
1)本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断。
2)试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时，请按国家生物试验室安全防护条例执行。
3)严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
4)洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
5)消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。
6)底物显色液应呈无色或很浅的颜色。
7)避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
8)在储存和温育时避免强光直接照射。
9)平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
10)任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
11)检测使用的酶标仪需要安装能检测 450±10nm 波长的滤光片，光密度范围在 0-3.5 之间。建议使用时提前 15 分钟预热。
12)请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。
13)试验中所用的 EP 管和吸头均为一次性使用，严禁混用。
14)请勿使用过期的试剂。
