WB实验的成功率，很大程度上由样本制备环节决定。为保证检测结果的准确性与可重复性，请根据以下要求进行样本的处理、保存与运输。
📋 样本类型及处理要求
🧫 细胞样本
细胞量：建议每份样本细胞数 ≥ 5×10⁶ 个。 处理：弃培养液，用预冷PBS洗涤1-2次，离心收集沉淀，吸干残留液体。 保存：细胞沉淀需液氮速冻后，于 -80℃ 保存，避免反复冻融。 注意：不能马上裂解的细胞沉淀，应速冻后-80℃保存，切勿直接放-20℃或4℃过夜。
🧬 组织样本
样本量：单份组织样本建议 ≥ 50-100 mg。 处理：离体后迅速用预冷PBS/生理盐水清洗去除血液杂质，吸干液体。 保存：组织块需液氮速冻后，于 -80℃ 长期保存。 注意：组织离体后需尽快处理，全程低温操作，建议分装成单次用量，避免反复冻融。
🩸 血清/血浆样本
采集：新鲜血液采集后，血清管（无抗凝）或血浆管（加抗凝）4℃暂存。 处理：建议在采集后 1-2天内 离心分离上清。 保存：分离后的上清于 -80℃ 冻存备用。 注意：应避免反复冻融，可分装成小份保存。
🧴 其他样本
细菌/酵母：离心收集菌体，PBS洗涤2次后速冻-80℃保存，或直接进行裂解。 植物组织：取样后需液氮速冻，研磨时也需在液氮保护下进行，以应对细胞壁和酚类物质干扰。 注意：此类样本同样需注意低温操作和避免反复冻融。
⚙️ 裂解液与关键添加物
🧪 裂解液选择
通用型：RIPA裂解液适用于大多数总蛋白提取。 特殊需求：针对膜蛋白、核蛋白等特殊定位蛋白，可能需要使用专用裂解液或优化配方。 原则：根据目标蛋白的定位（胞质、膜、核）和特性（是否需保持修饰状态）选择合适的裂解液。
🛡️ 关键添加物
蛋白酶抑制剂（必须加）：最常用 PMSF（工作浓度1mM），需临用前添加，因其在水溶液中半衰期短。 磷酸酶抑制剂：检测磷酸化蛋白时必须添加（如NaF、Na₃VO₄等），以防止去磷酸化。 还原剂：常用 DTT 或 β-巯基乙醇，可加入裂解液或上样缓冲液中。
📦 运输与保存要求
❄️ 运输条件
所有冻存的细胞沉淀、组织块、血清/血浆样本，均需全程 干冰密封运输。 严禁使用常温或普通冰袋运输，运输过程中应避免样本反复冻融。
🏷️ 标记与信息
样本管/冻存盒上须 清晰标注 样本编号、样本类型、日期，并确保信息唯一可追溯。 随样需附带送样信息表，注明样本类型、来源、处理条件及检测指标等关键信息。
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送样单下载
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