在生物医学实验中,血清和血浆是一对“长得像、脾气差很多”的血液兄弟。远看都是淡黄色透明液体,近看却一个没了纤维蛋白原,一个还死死拽着不放;一个要等血液自己凝固,一个得靠抗凝剂把凝血系统按住。选错了,轻则数据飘忽,重则实验白做。
血清是血液凝固后析出的清液。不加抗凝剂,凝血系统被激活,纤维蛋白原变成纤维蛋白网,把血细胞兜住形成凝血块,收缩后挤出的液体就是血清。因此血清里没有纤维蛋白原,凝血因子也基本消耗殆尽。
血浆则是全血加抗凝剂后,离心去掉血细胞得到的上层液体。纤维蛋白原还在,几乎全部凝血因子也都在。血浆中水分占 90~92%,溶质以白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原为主。除纤维蛋白原和部分凝血因子外,两者的大多数成分含量基本相同。
| 对比项 | 血清 | 血浆 |
|---|---|---|
| 抗凝剂 | 不加 | 需加(EDTA / 肝素 / 枸橼酸钠) |
| 纤维蛋白原 | 无(已转为纤维蛋白) | 有,完整保留 |
| 凝血因子 | 大部分消耗或转化 | 几乎全部保留(除凝血因子Ⅲ外) |
| 制备节奏 | 可等待,压力小 | 需在 30 分钟内离心 |
| 典型用途 | 生化、免疫、激素等多数指标 | 凝血功能、快速交换类物质 |
制备上,血清走“慢工出细活”路线:不加抗凝剂,让血液自行凝固收缩,操作者不必掐表离心。血浆则要“跟时间赛跑”:抗凝剂一加,凝血被按住,但部分待测物质仍在血细胞和血浆间交换,必须尽快离心,否则细胞内成分外漏会影响结果。
| 步骤 | 血清制备 | 血浆制备 |
|---|---|---|
| 采血管 | 无热原、无内毒素试管 | 含抗凝剂采血管 |
| 凝固/抗凝 | 室温静置 1 小时或 2~8℃ 过夜 | 抗凝剂即时作用,无需等待凝固 |
| 离心条件 | 2~8℃,1000×g,15~20 分钟 | 2~8℃,1000×g,15 分钟 |
| 时效要求 | 相对宽松 | 采集后 30 分钟内完成离心 |
| 收样 | 小心收集上清液 | 收集上层液体 |
ELISA 选样时,核心判断依据是:所测指标是否涉及凝血功能。大多数免疫和生化指标两者都能用;分水岭在于抗凝剂是否干扰目标物质,以及凝血因子本身是不是检测对象。
| 检测场景 | 推荐样本 | 原因 |
|---|---|---|
| 细胞因子、激素、抗体 | 血清或血浆均可 | 结果具有可比性,按试剂盒说明书选择 |
| 凝血功能类指标 | 血浆 | 血清中凝血因子已被消耗或转化 |
| 乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶、淀粉酶 | 血清 | 避免草酸盐等抗凝剂抑制酶活性 |
| 碱性磷酸酶、血管紧张素转化酶 | 血清 | 避免 EDTA 的抑制作用 |
| 尿酸、脲酶 | 血清 | 避免氟化物干扰 |
| 大批量样本快速处理 | 血浆 | 制备时效性优势明显 |
溶血释放的血红蛋白,其亚铁血红素会催化 TMB 导致假阳性,乳酸脱氢酶等指标亦升高。首选重新采血;无法重采需设对照。样本需分装,-20℃(1个月)或-80℃(3个月)保存,避免反复冻融(≤3次)。
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