用途
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 USP2 浓度。
检测原理
将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。
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反应类型 |
双抗夹心法 |
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规格 |
96T/48T |
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中文名称 |
人泛素特异性蛋白酶 2（USP2）ELISA试剂盒 |
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反应时间 |
1.5 h |
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检测方法 |
酶联免疫吸附测定 |
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检测范围 |
0.625 ng/mL – 20 ng/mL |
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灵敏度 |
0.31 ng/mL |
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上样体积 |
50 μL/孔 |
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样本类型 |
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
特异性
可检测样本中的USP2, 且与其它类似物无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
回收率
分别于定量血清或血浆样本中加入一定量的 USP2（加标样品），重复测定并 计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。
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样本 |
回收率范围（%） |
平均回收率（%） |
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血清（n=5） |
89-105 |
97 |
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EDTA血浆（n=5） |
84-104 |
96 |
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肝素血浆（n=5） |
89-101 |
95 |
标曲图
线性
在定值血清及血浆样本内加入适量的 USP2，并倍比稀释成 1:2，1:4，1:8， 1:16 的待测样本，线性范围即为稀释后样本中 USP2 含量的测定值与理论值的比率。
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样本 |
1:2 |
1:4 |
1:8 |
1:16 |
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血清（n=5） |
92-104 % |
96-108 % |
84-108 % |
89-103 % |
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EDTA血浆（n=5） |
89-113 % |
85-109 % |
88-106 % |
87-99 % |
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肝素血浆（n=5） |
86-104 % |
84-108 % |
88-112 % |
90-108 % |
批内差
取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差
选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100 CV<10% Inter-批间差: CV<13%
稳定性
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
试剂盒的组成
▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封4℃保存，其他4℃保存。
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英文名称 |
中文名称 |
规格 |
规格 |
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Microelisa stripplate |
包被微孔板 |
96T |
48T |
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Standard |
标准品 |
0.3ml/管*6 |
0.3ml/管*6 |
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HRP-Corjugate |
HRP标记抗体 |
10mL |
5mL |
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Sample Diluent |
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
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Chromogen SolutionA |
底物液A |
6mL |
3mL |
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Chromogen SolutionB |
底物液B |
6mL |
3mL |
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Stop Solution |
终止液 |
6mL |
3mL |
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20× Wash Solution |
20×浓缩洗涤液 |
25mL |
15mL |
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Product Description |
说明书 |
1份 |
1份 |
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Sealing film |
封板膜 |
2张 |
2张 |
实验所需自备物品
1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）
2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸馏水或去离子水.
5、脱脂棉吸水纸.
6、37℃恒温箱.
7、100ml和1000ml量筒.
