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固氮酶(nitrogenase)检测服务

实验收费标准

项目编号 项目名称 计价单位 单价
ZC-2162 固氮酶(nitrogenase) 230元

服务介绍

固氮酶的核心功能是还原 N₂为 NH₃,同时具有广谱还原活性,可将乙炔(C₂H₂)还原为乙烯(C₂H₄)。通过密封体系中通入定量乙炔,反应一定时间后,检测生成的乙烯浓度,结合反应条件计算固氮酶活性,活性单位通常以 nmol C₂H₄·g⁻¹·h⁻¹(每克根瘤每小时生成乙烯的纳摩尔数)表示。

应用范围

微生物固氮研究、微生物肥料研制、土壤改良研究、代谢调控途径分析、微生物代谢产物研究等。

技术优势

检测原理:乙炔还原法(固氮酶可以将乙炔气体还原成乙烯气体)

检测平台:气相色谱仪-氢火焰离子检测器(GC-FID) 

仪器设备

气相色谱仪(岛津GC-2010):配备氢火焰离子化检测器(FID)、

毛细管柱:(HP 30 m×0.32 mm×0.25 μm);

密封反应瓶:10 mL/20 mL 血清瓶(带橡胶塞 );

取样针:1 mL/5 mL 气密注射器;

分析天平:精度 0.1 mg;

恒温水浴锅:控温精度 ±0.5℃;

超声波清洗器:清洗反应瓶;

液氮 / 冰盒:样品运输与短期保存;

真空泵:吹扫反应瓶内空气

样本要求

土壤样品(1.0-5.0 g/样;若需测含水量≥10.0 g/样),干冰或冰袋运输。

根瘤样品(0.1-1.0 g/样),液氮速冻后置于-80℃保存,干冰运输。

菌液样品(1.0-2.0 ml/样),无氮培养基活化后,冰袋运输。

实验方案

1.取盆栽土样 1- 5 g 于 100 mL 血清瓶中,加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL,塞上异丁基胶塞摇匀,加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体,密封针眼,28 ℃培养 2 d。培养结束后,取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。

2.取0.1g-0.5g菌或0.5-1ml菌液 5于 100 mL 血清瓶中,加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL,塞上异丁基胶塞摇匀,加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体,密封针眼,28 ℃培养 2 d。培养结束后,取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。

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外包服务流程

 

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