实验收费标准
| 项目编号 | 项目名称 | 计价单位 | 单价 |
| ZC-2162 | 固氮酶(nitrogenase) | 个 | 230元 |
服务介绍
固氮酶的核心功能是还原 N₂为 NH₃,同时具有广谱还原活性,可将乙炔(C₂H₂)还原为乙烯(C₂H₄)。通过密封体系中通入定量乙炔,反应一定时间后,检测生成的乙烯浓度,结合反应条件计算固氮酶活性,活性单位通常以 nmol C₂H₄·g⁻¹·h⁻¹(每克根瘤每小时生成乙烯的纳摩尔数)表示。

应用范围
微生物固氮研究、微生物肥料研制、土壤改良研究、代谢调控途径分析、微生物代谢产物研究等。
技术优势
检测原理:乙炔还原法(固氮酶可以将乙炔气体还原成乙烯气体)
检测平台:气相色谱仪-氢火焰离子检测器(GC-FID)
仪器设备
气相色谱仪(岛津GC-2010):配备氢火焰离子化检测器(FID)、
毛细管柱:(HP 30 m×0.32 mm×0.25 μm);
密封反应瓶:10 mL/20 mL 血清瓶(带橡胶塞 );
取样针:1 mL/5 mL 气密注射器;
分析天平:精度 0.1 mg;
恒温水浴锅:控温精度 ±0.5℃;
超声波清洗器:清洗反应瓶;
液氮 / 冰盒:样品运输与短期保存;
真空泵:吹扫反应瓶内空气
样本要求
土壤样品(1.0-5.0 g/样;若需测含水量≥10.0 g/样),干冰或冰袋运输。
根瘤样品(0.1-1.0 g/样),液氮速冻后置于-80℃保存,干冰运输。
菌液样品(1.0-2.0 ml/样),无氮培养基活化后,冰袋运输。
实验方案
1.取盆栽土样 1- 5 g 于 100 mL 血清瓶中,加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL,塞上异丁基胶塞摇匀,加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体,密封针眼,28 ℃培养 2 d。培养结束后,取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。
2.取0.1g-0.5g菌或0.5-1ml菌液 5于 100 mL 血清瓶中,加入 0. 1 mol/L 葡萄糖液 2 mL,塞上异丁基胶塞摇匀,加铝盖密封。用注射器从瓶中抽出 5 mL 空气再注入等体积乙炔气体,密封针眼,28 ℃培养 2 d。培养结束后,取 500 μL 气样在气相色谱仪上测定乙烯峰值。
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