HOECHST染色是一种广泛用于细胞生物学和病理学实验的细胞核荧光染色技术。其核心原理是利用HOECHST荧光染料特异性地结合细胞内的DNA,通过荧光显微镜或流式细胞仪进行观察,主要用于细胞核形态的观察、细胞凋亡检测、细胞周期分析等。
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脱蜡至水:将切片依次放入二甲苯Ⅰ 20min - 二甲苯Ⅱ 20min - 无水乙醇Ⅰ 10min - 无水乙醇Ⅱ 10min - 95%酒精 5min - 90%酒精 5min - 80%酒精 5min - 70%酒精 5min - 蒸馏水洗。
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HOECHST染核:滴加HOECHST染液,避光孵育适当时间,甩干后用PBS洗涤。
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封片:滴加抗荧光淬灭封片剂封片,注意避免产生气泡。
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显微镜镜检:在荧光显微镜下观察并采集图像,HOECHST染色的细胞核在紫外光激发下呈蓝色荧光。